心肌细胞分化和纯化

稳定传代的单克隆进行心肌分化的条件摸索并分化出足量满足后续检测的心肌细胞

分化的心肌细胞过程中三个关键节点的图片和视频及纯化后的心肌细胞（心肌细胞搏动视频  15s各 2段 ）

1-2个月

心肌细胞的功能验证---免疫荧光染色

免疫荧光染色α-actinin， TNNT2

细胞免疫荧光照片

20天

心肌细胞相关基因RT-PCR检测

RT-PCR看NKX2-5，MYH6, MYH7, MLC2V，KCNH2，OCT4 ， NANOG在ips和相应的心肌细胞中的表达情况

RT-PCR结果图

30天

心肌细胞进行RTCA检测---Cell index；Beating Rate；Amplitude

RTCA各项检测数据

RTCA检测数据---   cell index；Beating Rate；Amplitude

20-30天

心肌细胞与RTCA检测同步六孔板细胞样本收集，RNA sep分析

样本收集，RNA sep 数据分析

RNA sep 数据分析结果

30天

心肌细胞与RTCA检测同步进行膜片钳检测

膜片钳检测自发动作电位和钠钾钙离子通道

膜片钳检测的电生理数据

20天

心肌细胞与RTCA检测同步进行胞内钙离子活性检测

样本处理心肌后，检测胞内钙活性

胞内钙离子活性检测数据

30天

实验报告

收到结果，撰写实验报告

结构清晰，数据图表完整

10天

合计

3-5月