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如何提高人心肌细胞的复苏存活率？ 

人心肌细胞复苏的要点是：1）复苏过程的时间尽量短，水浴解冻的时间≤90s，转移至超净台的过程 ≤20s，滴加 CardioEasy 心肌接种培养基的时间≤5min； 2）由于心肌细胞极易受到物理剪切力的伤害，转移和混匀细胞时要避免剧烈吹吸；3）准确控制滴加液体的速度，并在滴加过程中不断摇晃混匀。

人心肌细胞没有跳动怎么办？ 

人心肌细胞一般在接种后 2-3 天开始跳动，不超过 5 天。换液、传代和在培养箱外长期放置等导致

细胞外环境变化的操作，会使得心肌细胞停止跳动。如果心肌细胞长时间不跳动，请检查培养箱的 温度和 CO2浓度。  

是否能用胰酶消化人心肌细胞？ 

人心肌细胞极易受到伤害，不能使用胰酶等强力消化酶进行消化，需使用温和的消化酶accutase消化 心肌细胞，并准确掌握消化时间，使消化对心肌细胞的伤害降到最低。  

人心肌细胞如何形成单层组织？ 

人心肌细胞传导动作电位需要细胞间形成连接，按照合适的密度接种心肌细胞，可以形成均一的同 步化跳动的单层心肌组织。请参考说明书并结合实际经验，摸索出合适的接种密度。  

是否能用其它冻存液冻存人心肌细胞？ 

CryoStor cell cryopreservation media可最大程度地保护冻存人心肌细胞，提升心肌细胞的复苏存活率。 另外还可以使用90% KOSR+10% DMSO的冻存液，但复苏效率较低。不推荐使用90% CardioEasy心 肌维持培养基+10% DMSO的冻存液。  

CardioEasy心肌纯化试剂盒的作用是什么？ 

CardioEasy心肌纯化试剂盒是赛贝生物根据心肌细胞的生理特性研发出的心肌富集试剂盒，非心肌 的细胞在纯化培养基中无法存活。纯化后2周内，心肌细胞的纯度可达到99%。  

心肌细胞停止搏动或搏动缓慢 

1）心肌细胞在再接种操作后，需要1-3天才能恢复搏动；

2）心肌细胞在换液操作后、或在培养箱外 放置过久，会减缓搏动或停止搏动，需要1-3小时才能恢复正常搏动； 

3）心肌细胞长时间在CardioEasy 心肌纯化完全培养基中培养，搏动会减缓，需及时停止纯化，在CardioEasy心肌维持培养基中恢复4 天以上，才能再次纯化。