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PSCeasy®Ⅱ人多潜能干细胞培养基
PSCeasy®Ⅱ人多潜能干细胞(hESC/hiPSC)培养基是由赛贝生物(Cellapy® )自行研制开发的一款干细胞培养试剂。该试剂非饲养层依赖,化学成分明确,不含血清,无动物源成分,支持hESC/hiPSC体外高比例传代扩增,同时也支持单细胞传代,对维持hESC/hiPSC的多潜能性有着良好的效果。
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产品 | 规格 | 货号 |
PSCeasy ®Ⅱ人多潜能干细胞培养基 | 500mL | CA1014500 |
无饲养层细胞培养条件下,以PSCeasy®Ⅱ培养基进行扩增的hiPSC呈克隆集落样生长。
PSCeasy®Ⅱ培养基增殖曲线
以PSCeasy®Ⅱ培养基对多潜能干细胞进行长期培养(10次传代)后,采集到的多能性标记物染色结果。
经过以PSCeasy®Ⅱ培养基长期传代培养的hES细胞和hiPS细胞的基因表达谱聚类在一起,而与成纤维细胞(hFibroblast)差异较大(A)。同时,散点分布图数据的比较,也可以得出相同的结论(B,C)。
hiPSC和hESC在PSCeasy®Ⅱ培养基中连续培养十代后仍保持正常的核型
经过PSCeasy®培养基长期传代培养的hiPS细胞维持了其在体外分化为三个胚层细胞的潜能。
将hiPSC移植到免疫缺陷小鼠的肾包膜中,经过4-6周后可以形成具有不同胚层组织的畸胎瘤
hESC单细胞克隆形成实验
经过PSCeasy®Ⅱ培养基长期传代培养的hiPSC维持了其在体外分化为三个胚层细胞的潜能。
货号:CA1014500
规格:500mL
储存条件:基础培养基2 ~ 8℃,添加剂-80 ~ -20℃;混匀后2 ~ 8℃,2周内使用完毕。
产品简介:
PSCeasy®Ⅱ人多潜能干细胞培养基是赛贝生物(Cellapy®)开发出的一种适用于无饲养层培养、化学成分明确、并且不含动物源蛋白的人多潜能干细胞(hESC/hiPSC)完全培养基。hESC/hiPSC在PSCeasy®Ⅱ培养基中可以快速增殖,而分化的细胞则无法在该培养基中生长,从而选择性扩增并获得高纯度多潜能干细胞。
产品内容:
组份代码 | 名称 | 规格 | 数量 |
CA1014500-1 | PSCeasy®Ⅱ人多潜能干细胞基础培养基 | 500mL | 1瓶 |
CA1014500-2 | PSCeasy®Ⅱ人多潜能干细胞培养基添加剂 | 5mL 复溶 | 1支 |
是否还需要往PSCeasyⅡ培养基中补充或添加成分?
不需要。PSCeasyⅡ培养基中各个成分的质量和浓度都经过了最优化实验,完全支持人ESC/iPSC的长 期培养,您无需再自行添加。
培养基中有沉淀状物质是否是质量问题?
添加剂在解冻过程中,若有少量沉淀析出,属于正常现象,不影响使用,请充分混匀后与基础培养 基混合。但添加剂不能在37℃解冻,否则会析出大量沉淀,影响培养基的效价。如果培养基中出现 大量沉淀,请不要使用。
是否能在37℃预热PSCeasyⅡ完全培养基?
不能。频繁地在4℃和37℃之间转换会导致PSCeasyⅡ完全培养基中含有的因子失活,PSCeasyⅡ完全培 养基在使用前平衡至室温即可。
人ESC/iPSC在传代后不贴壁怎么解决?
造成人ESC/iPSC传代后不贴壁可能的原因:
1) 细胞消化时间不合适,或消化后吹打次数不合 适,使得完成传代后细胞集落过大或过小。
2) Matrix包被操作失误,请严格按照Matrix的操作说明 书分装与包被。
人ESC/iPSC分化怎么处理?
1)细胞在刚复苏或传代时,小的细胞团不呈现标准的克隆形态,培养几天或传代后可恢复。
2)如果人ESC/iPSC分化的表现为干细胞克隆形态良好,克隆周边出现散在的分化细胞,可通过高比例 传代(≥1:10),使得分化细胞的密度减少,低密度的分化细胞可被PSCeasy培养体系筛选去除,如 未完全去除,可用细胞刮或巴斯德管刮除。
3)如果人ESC/iPSC分化的表现为克隆内部松散,边缘 不平滑,在分化比例小或分化不严重的情况下,可通过连续传代2 ~ 3次恢复,如果分化严重,建 议弃除。
细胞复苏率低是什么原因?
细胞复苏需使用PSCeasy解冻液,可大大提高细胞的复苏效率。复苏过程中,转移细胞、吹打混匀 和重悬细胞时,吹打力度要轻柔,并尽量减少吹打次数,细胞接种后,即刻在显微镜下观察细胞团 块的大小,4 ~ 10个细胞的团块为最佳。如果吹打力度过大或次数过多,导致细胞分散成单细胞, 细胞复苏率将偏低。
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