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PSCeasy® 人多潜能干细胞消化液
PSCeasy® 人多潜能干细胞消化液可以应用于非饲养层依赖的hESC/hiPSC传代,该工作液属于非酶类温和消化液,对细胞损伤小且消化时间适中便于操作,是一种已被普遍使用的消化液,可与PSCeasy®人多潜能干细胞(hESC/hiPSC)培养基搭配使用。
- 产品介绍
- 产品说明书
PSCeasy® 人多潜能干细胞消化液的传代操作说明:
1. 将PSCeasy完全培养基取出并平衡至室温,取出包被过Matrix的培养皿/瓶,吸去包被液并加入适量PSCeasy完全培养基,置于5% CO2的37℃恒温细胞培养箱中。
2. 吸走待传代细胞培养皿/瓶中的PSCeasy完全培养基,并且加入无钙镁的PBS溶液洗一次。
3. 加入0.5mM EDTA传代工作液使之完全覆盖皿/瓶底。
4. 室温放置5 ~ 8 min或37℃恒温细胞培养箱中孵育3 ~ 5 min,显微镜下观察到大部分克隆边缘开始脱离皿/瓶底,克隆内部大部分细胞间出现间隙但尚未相互分离,肉眼观察到细胞集落变得不透明且发白,表明细胞消化时间理想。
5. 吸去传代工作液,即刻加入新鲜的PSCeasy完全培养基,用移液器扇形吹打培养皿/瓶底,使皿/瓶底贴附的干细胞集落脱落,轻柔缓慢吹吸混匀。
注:吹吸的力度要轻柔,吹打脱落和吹吸混匀的次数总共不超过10次为宜。吹打过度导致大量单细胞出现是造成细胞分化或死亡的重要原因。
注:如有少量细胞无法从皿底脱落,属于正常现象。如有大量细胞无法从皿底脱落,需延长消化时间。
6. 显微镜下观察细胞呈4 ~ 20个细胞大小的团块,水平十字摇匀。
7. 将细胞置于5% CO2的37℃恒温培养箱培养。
8. 每天换液直至达到可以传代的标准。
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