尿液细胞分离接种第2-3天

尿液细胞接种培养第7-8天

尿液细胞稳定传至第3代

Urineasy尿液细胞分离培养试剂盒部分引用文献：

Differentiation of Urine-Derived Human Induced Pluripotent Stem Cells to Alveolar Type II Epithelial Cells.CELLULAR REPROGRAMMING Volume 18, Number 1, 2016.(DOI：10.1089/cell.2015.0015)

产品说明书下载：

尿液细胞染菌如何避免？ 

1）采集尿液时，应对尿道口进行充分清洗，所有接触的物品需提前灭菌消毒，尿道口清洗后不可再 接触，直接排尿至无菌瓶中。2）由于尿液采集的环境非无菌级，尽量减少尿液采集操作的时间，无 菌瓶在排尿时才开盖，采集完后立即密封瓶口。3）收集尿液细胞时，需尽量减少无菌瓶和离心管的 开盖时间，移液管不可接触瓶/管外其它部位，每步操作更换新的移液管。 

收集后没有尿液细胞是什么原因？ 

离心弃除上清的操作容易损失尿液细胞：1）弃除上清时，必须将移液器的吸液速度调至最小，沿液面缓慢吸液，并保留足够量的剩余液体，过程中不可使底部的液体受到振动，使得沉淀在底部的细 胞漂起。2）离心机离心力不足，适当加大离心力，但不可高于 500g。 

尿液细胞中含有大量杂质是什么原因？ 

1）没有排出陈尿，另外晨尿（一天中第一次排尿）中含有大量杂质，不可采集晨尿。2）采样者当 天的饮食需尽量清淡，不可摄入高蛋白食品。3）采样者本身身体因素。 

尿液细胞不贴壁是什么原因？ 

1）尿液细胞贴壁前，需尽量减少对培养皿的移动，否则影响细胞的贴壁。建议只在换液时移动与观 察细胞。2）半量换液过程中，将新鲜培养液加入原皿中时，沿壁缓慢加入，或在液面上方以 3s 一 滴的速度逐滴加入，避免皿底的细胞受到振动漂起。3）Matrix 未严格按照要求低温操作，出现粘稠 或凝胶化，影响细胞贴壁，更换新的 matrix 严格按照操作说明书分装与包被。