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PSCeasy®Ⅱ人多潜能干细胞培养基

PSCeasy@Ⅱ人多潜能干纽胞(hESC/hiPSC)培养基是由赛贝生物(Cellapy)自行研制开发的一款干细胞培养试剂。该试剂非饲养层依赖,化学成分明确,不含血清,无动物源成分,支持hESC/hiPSC体外高比例传代扩增,同时也支持单细胞传代,对维持hESC/hiPSC的多潜能性有着良好的效果。

产品介绍

产品简介:

       PSCeasy®Ⅱ人多潜能干细胞培养基是赛贝生物(Cellapy®)开发出的一种适用于无饲养层培养、化学成分明确、并且不含动物源蛋白的人多潜能干细胞(hESC/hiPSC)完全培养基。hESC/hiPSC在PSCeasy®Ⅱ培养基中可以快速增殖,而分化的细胞则无法在该培养基中生长,从而选择性扩增并获得高纯度多潜能干细胞。

产品内容:

产品组份 名称 规格 数量
CA1014500-1 PSCeasy® Ⅱ人多潜能干细胞基础培养基   500mL 1瓶
CA1014500-2 PSCeasy® Ⅱ人多潜能干细胞基础培养基  添加剂 5mL 复溶 1支

储存条件:

       基础培养基2 ~ 8℃,添加剂-80 ~ -20℃;混匀后2 ~ 8℃,2周内使用完毕。

 

 

 

 

hESC单细胞克隆形成实验

 

存hiPSC移植到免疫缺陷小鼠的肾包膜中,经过4-6周后可以形成具有不同胚层组织的畸胎雁

 

疑难解答:

 

1.是否还需要往PSCeasyⅡ培养基中补充或添加成分? 

       不需要。PSCeasyⅡ培养基中各个成分的质量和浓度都经过了最优化实验,完全支持人ESC/iPSC的长 期培养,您无需再自行添加。

2.培养基中有沉淀状物质是否是质量问题?

      添加剂在解冻过程中,若有少量沉淀析出,属于正常现象,不影响使用,请充分混匀后与基础培养 基混合。但添加剂不能在37℃解冻,否则会析出大量沉淀,影响培养基的效价。如果培养基中出现 大量沉淀,请不要使用。

3.是否能在37℃预热PSCeasyⅡ完全培养基?

       不能。频繁地在4℃和37℃之间转换会导致PSCeasyⅡ完全培养基中含有的因子失活,PSCeasyⅡ完全培 养基在使用前平衡至室温即可。

4.人ESC/iPSC在传代后不贴壁怎么解决?

    造成人ESC/iPSC传代后不贴壁可能的原因:

1) 细胞消化时间不合适,或消化后吹打次数不合 适,使得完成传代后细胞集落过大或过小。

2) Matrix包被操作失误,请严格按照Matrix的操作说明 书分装与包被。

5.人ESC/iPSC分化怎么处理?

1)细胞在刚复苏或传代时,小的细胞团不呈现标准的克隆形态,培养几天或传代后可恢复。

2)如果人ESC/iPSC分化的表现为干细胞克隆形态良好,克隆周边出现散在的分化细胞,可通过高比例 传代(≥1:10),使得分化细胞的密度减少,低密度的分化细胞可被PSCeasy培养体系筛选去除,如未完全去除,可用细胞刮或巴斯德管刮除。

3)如果人ESC/iPSC分化的表现为克隆内部松散,边缘 不平滑,在分化比例小或分化不严重的情况下,可通过连续传代2-3次恢复,如果分化严重,建议弃除。

6.细胞复苏率低是什么原因?

      细胞复苏需使用PSCeasy解冻液,可大大提高细胞的复苏效率。复苏过程中,转移细胞、吹打混匀和重悬细胞时,吹打力度要轻柔,并尽量减少吹打次数,细胞接种后,即刻在显微镜下观察细胞团块的大小,4-10个细胞的团块为最佳。如果吹打力度过大或次数过多,导致细胞分散成单细胞, 细胞复苏率将偏低。

产品说明书:

PSCeasy® Ⅱ人多潜能干细胞培养基说明书

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