代替产品2

人诱导多能干细胞(绿荧光)hiPS-GFP-AAVS1

赛贝生物(Cellapy)提供的人诱导多能干细胞(带绿色荧光)(hiPSC-GFP-AAVS1)是由人体细胞通过非整合的方法诱导获得,再经过基因编辑插入GFP构建得到的报告工具细胞系。

产品介绍

产品简介: 

      赛贝生物(Cellapy)提供的人诱导多能干细胞(带绿色荧光)(hiPSC-GFP-AAVS1)是由人体细胞通过非整合的方法诱导获得,再经过基因编辑插入GFP构建得到的报告工具细胞系。hiPSC-GFP在无饲养层、化学成分明确并且无动物源成分的PSCeasy®人多潜能干细胞培养体系中培养,适合科学研究中干细胞研究和应用。hiPSC-GFP在PSCeasy®人多潜能干细胞培养体系中可以长期稳定快速增殖,具有高度近似hESC的克隆形态和基因表达,长期维持正常核型,并在体内外具有三胚层分化潜能。 

产品内容:

组分代码 名称 规格 数量 储存条件
CA4020106  人诱导多能干细胞(绿荧光)hiPSC-GFP-AAVS1  1×106  2支  液氮
CA1002008 PSCeasy®人多潜能干细胞复苏完全培养基  10mL 2瓶 -20℃ 


疑难解答: 
1. 细胞复苏率低是什么原因? 
      细胞复苏需使用PSCeasy®人多潜能干细胞复苏培养基,可大大提高细胞的复苏效率。复苏过程中,转移细胞、吹打混匀和重悬细胞时,吹打力度要轻柔,并尽量减少吹打次数,细胞接种后,即刻在镜下观察细胞团块的大小,4 ~ 10个细胞的团块为最佳。如果吹打力度过大或次数过多,导致细胞分散成单细胞,细胞复苏率将偏低。 
2.培养基中有沉淀状物质是否是质量问题? 
       添加剂在解冻过程中,会有少量沉淀析出,属于正常现象,不影响使用,请充分混匀后与基础培养基混合。但添加剂不能在37℃解冻,否则会析出大量沉淀,影响培养基的效价。如果培养基中出现大量沉淀,请不要使用。 
3.是否能在37℃反复水浴PSCeasy®完全培养基? 
      不推荐。频繁地在4℃和37℃之间转换会导致PSCeasy®完全培养基中含有的因子失活,PSCeasy®完全培养基在使用前放置至室温即可。 
4.是否能用dispase酶或者胶原酶进行传代? 
       在PSCeasy®培养体系中培养的人iPSC需用非酶的温和消化方式传代,用dispase酶或者胶原酶消化细胞会对细胞造成伤害,影响传代后细胞的存活率和贴壁率。 
5.细胞消化后成了单细胞是什么原因? 
       人iPSC消化成小克隆(4个以上20个以下的细胞聚集)进行传代最为适宜,消化为单细胞会短暂影响细胞的状态。 

造成细胞消化成单细胞的原因有: 
1)PSCeasy®人多潜能干细胞消化液消化过度,需减短消化时间。 
2) 对细胞悬液吹吸的力度过重,或次数过多,需缓慢吸液与吹液,每皿/瓶的吹吸次数控制在10次以下。 
6.人ESC/iPSC在传代后不贴壁怎么解决? 
造成人ESC/iPSC传代后不贴壁的最可能的原因:

1) 细胞消化时间过长,细胞消化过度

2)消化后吹打次数不合适,使得完成传代后细胞集落过大或过小。

3)消化时间过短,把细胞强行吹打下来。

7.人ESC/iPSC分化怎么处理? 
1) 细胞在刚复苏或传代时,小的细胞团不呈现标准的克隆形态,培养几天或传代后可恢复。 
2)如果人ESC/iPSC分化的表现为干细胞克隆形态良好,克隆周边出现散在的分化细胞,可通过高比例传代(≥1:6),使得分化细胞的密度减少,低密度的分化细胞可被PSCeasy®培养体系筛选去除,如未完全去除,可用细胞刮或巴斯德管刮除。 
3) 如果人ESC/iPSC分化的表现为克隆内部松散,边缘不平滑,在分化比例小或分化不严重的情况下,可通过连续传代2 ~ 3次恢复,如果分化严重,建议弃除。 

产品说明书:

人诱导多能干细胞(绿荧光)hiPSC-GFP-AAVS1 说明书

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