人诱导多能干细胞/hiPSC

产品介绍

储存条件：

      液氮储存

产品内容：

 细胞信息：

生长曲线检测结果：

      细胞增殖良好，倍增时间为24小时，为快速增长型细胞。

注：细胞在一次传代内的生长曲线与倍增曲线。A：细胞培养4天的生长曲线。纵轴：细胞数，横轴：培养时间。B：细胞培养4天的倍增曲线。纵轴：细胞倍增次数，横轴：培养天数。

免疫荧光染色检测：

细胞核型检测：

细胞核型检测--- 46，XY（G带），核型正常

畸胎瘤检测：

疑难解答:

1.细胞复苏率低是什么原因？ 

       细胞复苏需使用PSCeasy®解冻液，可大大提高细胞的复苏效率。复苏过程中，转移细胞、吹打混匀和重悬细胞时，吹打力度要轻柔，并尽量减少吹打次数，细胞接种后，即刻在镜下观察细胞团块的大小，4~10个细胞的团块为最佳。如果吹打力度过大或次数过多，导致细胞分散成单细胞，细胞复苏率将偏低。

2.培养基中有沉淀状物质是否是质量问题？ 

       添加剂在解冻过程中，若有少量沉淀析出，属于正常现象，不影响使用，请充分混匀后与基础培养基混合。但添加剂不能在37℃解冻，否则会析出大量沉淀，影响培养基的效价。如果培养基中出现大量沉淀，请不要使用。

3.是否能在37℃预热PSCeasyⅡ完全培养基？

       不能。频繁地在4℃和37℃之间转换会导致PSCeasyⅡ完全培养基中含有的因子失活，PSCeasyⅡ完全培养基在使用前平衡至室温即可。

4.细胞消化后成了单细胞是什么原因？ 

       人iPSC消化成小克隆（4个以上20个以下的细胞聚集）进行传代最为适宜，消化为单细胞会短暂影响细胞的状态。造成细胞消化成单细胞的原因有:

1)0.5mM EDTA传代工作液消化过度，需减短消化时间。

2)对细胞悬液吹吸的力度过重，或次数过多，需缓慢吸液与吹液，每皿/瓶的吹吸次数控制在10次以下。

5.人iPSC在传代后不贴壁怎么解决？

       造成人ESC传代后不贴壁的最可能的原因：

1)细胞消化时间不合适，或消化后吹打次数不合适， 使得完成传代后细胞集落过大或过小。

2)Matrix包被的操作失误，请严格按照Matrix的操作说明书分装与包被Matrix。

      人iPSC分化怎么处理？

1)细胞在刚复苏或传代时，小的细胞团不呈现标准的克隆形态，培养几天或传代后可恢复。

2)如果人iPSC分化的表现为干细胞克隆形态良好，克隆周边出现散在的分化细胞，可通过高比例传代 （≥1:10），使得分化细胞的密度减少，低密度的分化细胞可被PSCeasy®培养体系筛选去除，如未完全去除，可用细胞刮或巴斯德管刮除。

3)如果人iPSC分化的表现为克隆内部松散，边缘不平滑， 在分化比例小或分化不严重的情况下，可通过连续传代2~3次恢复，如果分化严重，建议弃除。

产品说明书：

人诱导多能干细胞（hiPSC）说明书