代替产品2

人诱导多能干细胞/hiPSC

赛贝生物(Cellapy®)提供的人诱导多能干细胞(hiPSC)是由人体细胞通过非整合的方法诱导获得。hiPSC在无饲养层、化学成分明确、并且无动物源成分的PSCeasy®人多潜能干细胞培养体系中培养,适合临床级的干细胞研究和应用。hiPSC在PSCeasy®人多潜能干细胞培养体系中可以长期稳定快速增殖,具有高度近似人ES细胞的克隆形态和基因表达,长期维持正常核型,并在体内外具有三胚层分化潜能。

产品介绍

储存条件:

      液氮储存

产品内容:

组份代码

名称

规格

数量

参见细胞管标签或COA 人诱导多能干细胞(hiPSC) 1×106 2支
CA1002008 PSCeasy®人多潜能干细胞复苏完全培养基 10mL 2瓶

 细胞信息:

项目

内容
名称 hiPSC-人诱导多能干细胞
来源 37岁男性尿液肾上皮细胞
诱导方式 仙台
规格 1×106

生长曲线检测结果:

      细胞增殖良好,倍增时间为24小时,为快速增长型细胞。

 

 

 

注:细胞在一次传代内的生长曲线与倍增曲线。A:细胞培养4天的生长曲线。纵轴:细胞数,横轴:培养时间。B:细胞培养4天的倍增曲线。纵轴:细胞倍增次数,横轴:培养天数。

 

免疫荧光染色检测:

 

细胞核型检测:

 

 

细胞核型检测--- 46,XY(G带),核型正常

 

畸胎瘤检测:

 

 

疑难解答:

1.细胞复苏率低是什么原因? 

       细胞复苏需使用PSCeasy®解冻液,可大大提高细胞的复苏效率。复苏过程中,转移细胞、吹打混匀和重悬细胞时,吹打力度要轻柔,并尽量减少吹打次数,细胞接种后,即刻在镜下观察细胞团块的大小,4~10个细胞的团块为最佳。如果吹打力度过大或次数过多,导致细胞分散成单细胞,细胞复苏率将偏低。

2.培养基中有沉淀状物质是否是质量问题? 

       添加剂在解冻过程中,若有少量沉淀析出,属于正常现象,不影响使用,请充分混匀后与基础培养基混合。但添加剂不能在37℃解冻,否则会析出大量沉淀,影响培养基的效价。如果培养基中出现大量沉淀,请不要使用。

3.是否能在37℃预热PSCeasyⅡ完全培养基?

       不能。频繁地在4℃和37℃之间转换会导致PSCeasyⅡ完全培养基中含有的因子失活,PSCeasyⅡ完全培养基在使用前平衡至室温即可。

4.细胞消化后成了单细胞是什么原因? 

       人iPSC消化成小克隆(4个以上20个以下的细胞聚集)进行传代最为适宜,消化为单细胞会短暂影响细胞的状态。造成细胞消化成单细胞的原因有:

1)0.5mM EDTA传代工作液消化过度,需减短消化时间。

2)对细胞悬液吹吸的力度过重,或次数过多,需缓慢吸液与吹液,每皿/瓶的吹吸次数控制在10次以下。

5.人iPSC在传代后不贴壁怎么解决?

       造成人ESC传代后不贴壁的最可能的原因:

1)细胞消化时间不合适,或消化后吹打次数不合适, 使得完成传代后细胞集落过大或过小。

2)Matrix包被的操作失误,请严格按照Matrix的操作说明书分装与包被Matrix。

      人iPSC分化怎么处理?

1)细胞在刚复苏或传代时,小的细胞团不呈现标准的克隆形态,培养几天或传代后可恢复。

2)如果人iPSC分化的表现为干细胞克隆形态良好,克隆周边出现散在的分化细胞,可通过高比例传代 (≥1:10),使得分化细胞的密度减少,低密度的分化细胞可被PSCeasy®培养体系筛选去除,如未完全去除,可用细胞刮或巴斯德管刮除。

3)如果人iPSC分化的表现为克隆内部松散,边缘不平滑, 在分化比例小或分化不严重的情况下,可通过连续传代2~3次恢复,如果分化严重,建议弃除。

产品说明书:

人诱导多能干细胞(hiPSC)说明书

首页    人诱导多能干细胞/hiPSC

浏览此商品的顾客同时也查看了