CardioEasy®人心肌细胞分化试剂盒

产品介绍

储存条件：

       基础培养基：2~8℃，添加剂Ⅰ/Ⅱ/Ⅲ：-80~-20℃，混和后2~8℃，1个月内使用完毕。

产品内容：

CardioEasy®人心肌细胞分化试剂盒诱导hiPSC向心肌分化过程:

A，分化前的U-IPS，Day0；B，分化72h的细胞形态；C，分化结束获得的心肌细胞；D，纯化后纯度≧90%的心肌细胞。

疑难解答：

1.CardioEasy人心肌分化试剂盒能否适用于PSCeasy以外的培养体系？

       理论上，CardioEasy人心肌分化试剂盒可以适用于所有无饲养层培养体系的多潜能干细胞。在实际操作中，良好的细胞生长状态是决定心肌分化成功的关键因素，建议采用经过测试的PSCeasy培养体系，采用其他体系会产生不确定因素而提高实验难度。

2.分化过程中出现大量死细胞且液体严重偏黄是否可以提前换液？ 

       心肌分化高度依赖于细胞的自分泌和旁分泌因子，换液将降低因子的浓度。在心肌分化步骤4-6过程中，需严格按照说明书要求的时间间隔更换培养基。在心肌分化步骤8过程中，当观察到有搏动的心肌细胞出现，可以根据液体颜色偏黄的程度，缩短换液间隔时间。

3.CardioEasy人心肌细胞消化液传代心肌细胞时，何种程度才算是消化合适？超过推荐时间（30min）会对心肌细胞造成损伤吗？

       加入CardioEasy人心肌细胞消化液后，显微镜下观察细胞脱离皿底，观察细胞呈“圆形”，即 可终止消化。消化终止时细胞不需要呈单细胞，而是通过吹打将细胞制成单细胞悬液。可根据具体情况适当延长/缩短消化时间，1小时之内，不会对心肌细胞造成过大损伤。

4.心肌细胞停止搏动或搏动缓慢?

1）心肌细胞在再接种操作后，需要1~3天才能恢复搏动；

2）心肌细胞在冻存复苏操作后，需要3~5天才能恢复搏动；

3）心肌细胞在换液操作后、或在培养箱外放置过久，会减缓搏动或停止搏动，需要1~3小时才能恢复正常搏动；

4）心肌细胞在特殊处理后，需要一段时间恢复期才能正常搏动；某些特殊处理对心肌细胞造成剧烈损伤，心肌细胞的状态将难以复原。